Biomodel

7. Laboratorios Virtuales

7.2. Técnicas de laboratorio. Cromatografía en columna.

El laboratorio de cromatografía permite separar los componentes de una mezcla.

Cromatografía en columna de biomoléculas

Para niveles superiores, podemos utilizar algunos de los ejemplos y ejercicios que nos ofrece la plataforma, pero también puede servir simplemente para visualizar la técnica en niveles más bajos.

Lo primero que nos ofrece es una introducción teórica sobre la técnica de la cromatografía, que será interesante repasar antes de hacer de la práctica: Apuntes.

Para realizar la parte práctica, iremos al último enlace, "Simulador de cromatografía en columna para proteínas".

Elementos del laboratorio de cromatografía

Tenemos la posibilidad de elegir las proteínas de la mezcla que vamos a separar, o bien elegir una mezcla problema desconocida. En los desplegables A, B, C, elegimos las proteínas de nuestro interés en base a su masa molecular o a su producto iónico (pI).

Por otra parte, en la parte superior debemos elegir la matriz cromatográfica (fase estacionaria) y el tampón de elución (fase móvil), en base al pH. En niveles superiores, podemos hacer un estudio de las características de ambos, para elegir razonadamente el más adecuado. En niveles inferiores, simplemente se puede hacer por prueba y error, hasta conseguir que las tres sustancias, representadas por colores al eluir por la columna, salgan completamente separados. 

Componentes separados por colores en la columna

El gráfico inferior de Absorbancia vs Volumen de elución, representa el detector y cada sustancia es detectada como un pico de absorbancia. 

Gráfico de absorbancia del detector de cromatografía